YY/T 1699-2020 組織工程醫(yī)療器械產品 殼聚糖

范圍
本標準規(guī)定了用于制備組織工程醫(yī)療器械產品的殼聚糖及其鹽的要求、試驗方法等。
本標準適用于制備組織工程醫(yī)療器械產品的殼聚糖及其鹽。

術語和定義
下列術語和定義適用于本文件。
殼聚糖  chitosan
由2-氨基-2-脫氧-D-吡喃葡萄糖(GlcN)和2-乙酰氨基-2-脫氧-D-吡喃葡萄糖(GlcNAc)通過β(1→4)連接而成的線性多糖。其結構式為:


脫乙酰度  degreeofdeacetylation
一個殼聚糖分子中葡萄糖胺單元(脫乙?；膯卧?的摩爾分數(shù)。

分類
按照是否與酸結合，可分為殼聚糖、殼聚糖鹽酸鹽、殼聚糖乙酸鹽、殼聚糖谷氨酸鹽和殼聚糖乳酸鹽。

動物源性材料要求
動物組織中提取制備的殼聚糖及其鹽應按照 YY/T 0771.1、YY/T 0771.2、YY/T 0771.3 的要求進行管理和控制。

要求
性狀
類白色或淡黃色粉末狀、絲狀或片狀的固體，無臭。
傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)
殼聚糖或殼聚糖鹽傅里葉變換紅外光譜應符合相應的特征峰，寬峰(b)數(shù)值偏差不大于150cm^-1，其他峰數(shù)值偏差不大于20cm^-1。殼聚糖或殼聚糖鹽典型的FT-IR頻率(cm^-1)如表1所示。


含量
以干燥品計算，殼聚糖或其鹽的含量應不小于85%。
脫乙酰度
應為標示值的90%~110%。
pH
殼聚糖檢測液的pH應為5.0~8.0；殼聚糖鹽檢測液的pH應為4.0~6.0。
動力黏度
在20°C時殼聚糖的動力黏度不得超過標示量的 80%~120%。
注: 以mPa·s或Pa·s為單位標明黏度。
重均分子量及相對分子質量分布
殼聚糖或其鹽重均分子量和相對分子質量分布(Mw/Mn)由制造商確定。
重金屬含量
重金屬含量(以Pb計)應不大于10μg/g(質量分數(shù))。
蛋白質含量
殼聚糖蛋白質殘留量應不大于0.2%(質量分數(shù))。
乙醇等有機溶劑殘余量
乙醇殘余量應不大于0.5%(質量分數(shù))。
注: 如在加工過程中使用了除乙醇之外的其他有機溶劑，干燥失重應不大于10%(質量分數(shù))。
熾灼殘渣
應不大于1.0%(質量分數(shù))。
不溶物
應不大于0.5%(質量分數(shù))。
砷鹽
不得過百萬分之一。
細菌內 毒素含量
每1.0mg殼聚糖或其鹽細菌內毒素含量應小于0.05EU。
注: 如果以非無菌的方式提供，則最終用戶需進行去除細菌內毒素的處理以達到細菌內毒素要求。
無菌試驗
應無菌。如果殼聚糖或其鹽以無菌方式提供，應進行該項目的檢測，并按照 GB 18278.1、GB 18279.1、GB18280.1 進行無菌工藝確認。如果采用環(huán)氧乙烷滅菌，還應按照 GB/T 16886.7 對其殘留量進行控制和檢測。
微生物限度
每克(g)供試品中需氧菌總數(shù)小于100CFU，霉菌和酵母菌菌落數(shù)小于20CFU，不得檢出金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和大腸埃希菌。
注: 如果殼聚糖或其鹽以非無菌的方式提供，則進行該項目的檢測。
生物學性能
應按照 GB/T 16886.1 的要求對殼聚糖及其鹽進行生物學評價。

試驗方法
脫乙酰度
脫乙酰度可采用以下方法測定，但不限于以下方法，應符合"脫乙酰度"規(guī)定。
殼聚糖鹽樣品的制備
稱取約2g殼聚糖鹽，置燒杯中，加乙醇100mL，邊攪拌邊滴加10%氫氧化鈉溶液，至pH大于8。過濾，用水洗滌沉淀物至洗出液呈中性，50°C干燥4h，再于105°C干燥至恒重，作為供試品。

脫乙酰度測定——酸堿滴定法
準確稱取在105°C下干燥至恒重的樣品0.2g~0.3g，置于250mL錐形瓶中，加入0.1mol/L的鹽酸滴定液30mL，在20°C~25°C下攪拌至溶解(可加入適量水稀釋)。加入甲基橙-苯胺藍(將0.1%的甲基橙水溶液和0.1%苯胺藍水溶液以1:2體積比混合)指示劑5滴~6滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴至紅色褪去。按式(1)和式(2)計算。

式中:
p  ——樣品中氨基含量，%；
c₁ ——鹽酸滴定液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
V₁——鹽酸滴定液的體積，單位為毫升(mL)；
c₂ ——氫氧化鈉滴定液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
V₂——氫氧化鈉滴定液的體積，單位為毫升(mL)；
16——氨基的相對分子質量；
m ——樣品質量，單位為克(g)；
D.D——樣品的脫乙酰度，%；
203——N-乙酰氨基-D-葡萄糖結構單元相對分子質量；
42 ——乙?；南鄬Ψ肿淤|量。

脫乙酰度測定——雙突躍電位滴定法
準確稱取在105°C下干燥至恒重的樣品0.2g~0.3g，加入過量的0.1mol/L鹽酸滴定液，攪拌至溶解。然后在電位滴定裝置上用氫氧化鈉滴定液滴定，氫氧化鈉滴定液首先中和過量的HCl，pH出現(xiàn)急劇上升，即第一個突變，然后氫氧化鈉滴定液再中和與殼聚糖的氨基結合的鹽酸，達到滴定等當點時，pH出現(xiàn)第二個突變，兩個突躍點消耗的氫氧化鈉摩爾數(shù)相當于樣品中的氨基摩爾數(shù)。按式(3)計算。

式中:
D.D——樣品的脫乙酰度，%；
ΔV ——兩突躍點之間消耗的氫氧化鈉滴定液體積之差，單位為毫升(mL)；
c_NaOH——氫氧化鈉滴定液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
m ——樣品質量，單位為克(g)；
16——氨基的相對分子質量；
0.0994——理論氨基含量。
以方法"脫乙酰度測定——雙突躍電位滴定法"為仲裁方法。


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